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    BCA蛋白定量試劑盒短時間即可完成操作!

    閱讀次數:174    發布時間:2019/7/4 14:24:28

    BCA蛋白定量試劑盒短時間即可完成操作!


    目前世界上*常用的蛋白濃度檢測方法是:BCA蛋白定量試劑盒(BCA Protein AssayKit)和Bradford蛋白定量試劑盒(Bradford Protein Assay Kit)。BCA 法與傳統方法相比,更簡單、更穩定、更靈敏度。BCA法測定蛋白濃度兼容性亦很好,不受大部分樣本中其他成分的影響,對于5%以內的SDS、Triton X-100、Tween 20、 Tween 80具有很好的兼容性。BCA法測定蛋白濃度易受螯合劑、高濃度的還原劑影響。在BCA法測定蛋白濃度前應盡量使EDTA濃度≤m10M; DTT濃度≤1mM,2-ME≤0.01%。


    規格:250T
    保存:室溫,避光,
    有效期:12個月
    用途:總蛋白定量的二喹啉甲酸/BCA分析
    說明:主要由BCA溶液、Cu溶液、BSA標準品組成,在562nm處測吸光值,檢測范圍在200-1000ug/ml。


    操作注意:

    1、 蛋白標準(BSA)粉末溶解于蛋白標準配制液后,即獲得蛋白標準原液,該原液中含有防腐劑,不影響后續檢測,該蛋白標準原液-20℃長期保存。

    2、 待測蛋白溶解于什么樣的稀釋液中,蛋白標準也宜溶解于什么樣的稀釋液中,否者待測蛋白與蛋白標準中所含非蛋白成分不一致,有可能導致測定不準確。

    3、 待測蛋白和蛋白標準加入BCA工作液后,如果發現檢測效果不佳,可以室溫放置2h或60℃放置30min,顏色會隨著時間的延長不斷加深。顯色反應也會隨溫度升高而加快。如果濃度較低,可以適當延長孵育時間或在較高溫度下孵育。

    4、 測定標準曲線時發現隨著標準品濃度的增加吸光度或顏色沒有明顯變化,可能的原因是樣品中含有嚴重干擾BCA法測定蛋白濃度的物質。


    二價銅離子在堿性的條件下,可以被蛋白質還原成一價銅離子,一價銅離子和獨特的BCA Solution A(含有BCA)相互作用產生敏感的顏色反應。兩分子的BCA螯合一個銅離子,形成紫色的反應復合物。該水溶性的復合物在562nm處顯示強烈的吸光性,吸光度和蛋白濃度在廣泛范圍內有良好的線性關系,因此根據吸光值可以推算出蛋白濃度。



    BCA蛋白定量試劑盒短時間即可完成操作!

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