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    乳鐵蛋白如何正確的使用方法!

    閱讀次數:309    發布時間:2019/7/2 10:39:43

    乳鐵蛋白如何正確的使用方法!


    乳鐵蛋白(lactoferrin,LF)是乳汁中一種重要的非血紅素鐵結合糖蛋白,中性粒細胞顆粒中具有殺菌活性的單體糖蛋白。其分子量為80 kDa,主要由上皮細胞表達和分泌。


    研究表明,乳鐵蛋白是動物初乳中的天然蛋白質,是一種多功能蛋白質。研究表明,乳鐵蛋白肽具有廣泛的生物學活性,包括廣譜抗菌作用、消炎、抑制腫瘤細胞生長及調節機體免疫反應等,被認為是一種新型抗菌、抗癌藥物和開發潛力的食品、化妝品添加劑,市場前景廣闊。


    2012年3月30日,中國《食品安全國家標準——食品營養強化劑使用標準》將乳鐵蛋白列入GB14880-2012,認定為食品營養強化劑,乳鐵蛋白也是母乳中含有的特有的成份,可以抑制病毒和有害菌,有提高嬰兒免疫力的作用。


    目前報道的Lf分離方法很多,主要有色譜法(吸附色譜法、離子交換色譜法、親和色譜法、固定化單系抗體法等)和超濾法。


    色譜法的優點是分離效果好、純度高,抗體被固定化可重復使用,其缺點是柱的制備工藝復雜,抗體成本昂貴,難以工業化生產。超濾法操作簡便,費用相對較低,易于形成工業化規模,其缺點是乳鐵蛋白純度較低,膜需經常清洗。


    超濾法是生產食品用乳鐵蛋白zui具實現工業化潛力的方法之一 ,具有極高的營養價值。


    乳鐵蛋白及其蛋白降解產物—乳鐵蛋白肽具有廣泛的生物學活性,包括廣譜抗菌作用、消炎、抑制腫瘤細胞生長及調節機體免疫反應等,被認為是一種新型抗菌、抗癌藥物和開發潛力的食品、化妝品添加劑,如美國食品藥品管理局早巳允許乳鐵蛋白作為食品添加劑用于運動、功能性食品。



    原理:混有乳鐵蛋白(LF) 抗原的瓊脂糖傾入平板,凝凍后打一些小孔,接入LF樣品。隨著抗原呈放射形擴散, 在以小孔為中心的環狀區域形成抗原?抗體反應沉淀帶, 沉淀帶在RID染色液的作用下被染色,環的直徑與抗體(LF)的濃度成正比。通過標準曲線,可以測出樣品中的(LF) 濃度。


    操作步驟:將預涂過的玻璃板置于水平桌面上,在瓊脂糖緩沖液中 加入150ml(抗血清,仔細混合后將溶液倒在玻璃板中心。表面張力可以阻止溶液溢出,必要時用試管上緣幫助溶液分散以確保溶液均勻分散到玻璃板的各邊。


    將凝膠在室溫下固化15min,然 后置于恒濕器中在冰箱中保存1h 。將打孔器與抽真空設備連接,并利用帶模板的隔板架在凝膠上 打16個小孔。


    用注射器小心地將12.5ml樣品注入玻璃板中,將凝膠置于恒濕器中,室溫下在水平桌面上放置48h后清洗凝膠。選擇正確角度,2次測量環的直徑,以此來測定LF濃度。


    結果計算:每毫升LF的濃度(×10 ) =
    式中:A為LF標準溶液(mg/mL) ;
    W為質量(mg) 。


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